前言：本发明涉及从大肠杆菌中分离纯化重组硫氧还蛋白融合蛋白的方法，包括用适当pH值的破碎液悬浮含有硫氧还蛋白融合蛋白的大肠杆菌，破碎大肠杆菌，离心获得沉淀；以及用含适当浓度尿素的溶解液溶解沉淀，离心获得上清液；所述上清液中含有所述硫氧还蛋白融合蛋白。本发明还涉及利用上述方法制备重组外源蛋白的方法。本发明的方法简便，硫氧还蛋白融合蛋白的得率较高，分离纯化容易，对融合的外源蛋白的性质没有任何影响，适于对重组外源蛋白的大规模生产。